品系简称   ApoE KO

修饰类型   Knock out

背景品系   C57BL/6J

相关基因   Apolipoprotein E

比较医学

ApoE基因敲除小鼠模型表现出异常高血脂症状，在3月龄时即出现动脉脂肪堆积。随着月龄增加将出现大量类似动脉粥样硬化前期的损伤。17月龄时小鼠脑内将出现脂瘤性纤维瘤，同时还有脂质小球和泡沫细胞。最新研究还发现该基因剔除小鼠的学习记忆能力出现障碍。ApoE基因是目前国内外研究的热点之一，ApoE与CHD、高脂血症、脑梗塞、AD及慢性乙型肝炎等疾病相关。ApoE基因剔除小鼠是研究该基因与多种相关疾病的重要模型。

用途

研究动脉粥样硬化的较好的动物模型；此外， ApoE基因敲除小鼠还是抗糖尿病药物筛选的动物模型之一。

以美国北卡罗来纳大学教堂山分校Dr. Nobuyo Maeda开发的ApoE KO小鼠为例：

原始论文：

Piedrahita, J. A., et al. (1992). Generation of mice carrying a mutant apolipoprotein E gene inactivated by gene targeting in embryonic stem cells. PNAS, 89(10), 4471–4475. https://doi.org/10.1073/pnas.89.10.4471

携带Apoe基因敲除突变的纯合子小鼠显示出总血浆胆固醇水平显著增加，这种增加不受年龄或性别的影响。在三个月龄时，可以在近端主动脉中发现脂肪条纹。随着年龄的增长，这些病变会增大，并发展成含有较少脂质但细胞更长的病变，这是更为晚期的前动脉粥样硬化病变的典型特征。ApoE KO小鼠可用于研究ApoE在心血管疾病（如动脉粥样硬化）、脂肪代谢以及阿尔茨海默病中的作用。

详细描述：

携带Apoe KO突变的纯合子小鼠显示出总血浆胆固醇水平显著增加，这种增加不受年龄或性别的影响。在三个月龄时，可以在近端主动脉中发现脂肪条纹。随着年龄的增长，这些病变会增大，并发展成含有较少脂质但细胞更长的病变，这是更为晚期的前动脉粥样硬化病变的典型特征。在混合C57BL/6 x 129遗传背景的小鼠上，已报告这种突变的甘油三酯水平略有增加。年龄大的ApoE敲除小鼠（>17个月）已被证明在大脑中发展出由晶状体胆固醇缝隙、脂质小滴和泡沫细胞组成的黄脂瘤病变。在脉络丛和脑室下部也可见较小的黄脂瘤。额外的研究表明，ApoE敲除小鼠对压力的反应改变，空间学习和记忆受损，长期增强改变，以及突触损伤。

纯合ApoE敲除小鼠可存活且能生育。

构建过程：

Apoe KO突变品系是在北卡罗来纳大学教堂山分校的Nobuyo Maeda博士的实验室中开发的，目的是替换载脂蛋白E（Apoe）基因的第三外显子部分和第三内含子部分，用新霉素抗性（neo）质粒替换。

靶向载体被电穿孔到129P2/OlaHsd衍生的E14Tg2a胚胎干细胞（ES）中，产生的小鼠被回交到C57BL/6近交系小鼠至少10代。到达杰克逊实验室后，精子被冷冻保存。为了建立我们的活体种群，使用冷冻精子的一部分来受精C57BL/6卵母细胞。

值得注意的是，在1995年之前，仅分发了回交6次（N6）到C57BL/6小鼠的小鼠。N6代的小鼠对粉红眼稀释p基因是纯合子，使它们的眼睛呈粉红色，毛发呈银白色。E14Tg2a ES细胞系携带这种隐性突变，它在N6回交代的小鼠中与靶向的Apoe基因在染色体7上保持连锁。N6种群的小鼠自1995年以来不再提供分发。

分子注释：

插入一个新霉素抗性质粒，删除了Apoe基因的第三外显子部分和第三内含子部分。使用兔抗大鼠APOE抗体进行Ouchterlony双免疫扩散试验时，纯合子突变小鼠的血浆中没有检测到可免疫沉淀物。

体重数据：

同样的20只雄性和20只雌性小鼠从4周龄断奶开始，每周称重直到14周龄。数值代表平均值和标准差。小鼠饲喂含有6%脂肪的饮食（LabDiet 5K52配方）。年龄误差为±3天。