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B6 CD45.1小鼠：用细胞表面等位标记追踪造血来源
B6 CD45.1是一种携带Ptprcᵃ等位标记的同源导入品系，可借助等位特异性抗体区分供者与受者白细胞，常用于移植、嵌合与过继转移研究。
基因信息
| 项目 | 已核实信息 |
|---|---|
| 物种及背景 | 小鼠；C57BL/6背景上导入SJL相关遗传区段的同源导入品系 |
| 核心基因 | 第1号染色体Ptprc，编码受体型蛋白酪氨酸磷酸酶CD45 |
| 等位标记 | Ptprcᵃ对应常用CD45.1标记，与普通B6常用的Ptprcᵇ/CD45.2区分 |
| 伴随遗传信息 | 品系包含连锁的Pepcᵇ标记及邻近导入区段，不能简化为仅一个核苷酸不同 |
| 模型类别 | 通过杂交、回交及标记选择建立的同源导入工具品系，不是CD45敲除或荧光敲入 |
| 检测方式 | 使用抗CD45.1/CD45.2抗体区分细胞；颜色来自检测标记，不是细胞内源荧光 |
| 常用状态 | 本品系的CD45.1标记背景；与CD45.2杂交的F1可同时表达两种标记，需单独记录 |
品系简介：给细胞加上可辨识的来源标签
CD45参与白细胞信号调控。CD45.1与CD45.2是可由抗体区分的等位抗原标记，而不是CD45RA、CD45RO等可变剪接异构体的另一套名称。将标记不同的细胞组合在同一实验体系中，可以在检测时判断哪些白细胞来自供者、竞争者或受者。
例如，CD45.1供者细胞进入CD45.2受者后，研究者可以检测供者相关白细胞的比例、数量与谱系分布。但看到CD45.1阳性细胞只说明其符合预设的来源标记，不直接证明它是造血干细胞，也不能单独证明具有长期、多谱系重建能力。
建立方法与遗传背景
该品系采用传统同源导入路线：将携带差异标记的遗传材料通过杂交和连续回交引入B6背景，并在各代选择目标标记。此过程会保留与目标位点相连的一段遗传区间，不能被写成仅在B6基因组中精确替换一个CD45表位。
Waterstrat等（2010）对这一类B6.SJL同源导入品系的遗传区间与造血功能进行分析；Mercier等（2016）进一步指出，常用品系的导入区间包含许多基因，并在特定竞争移植条件下出现功能差异。因此，“congenic”并不意味着两个品系在研究所关心的所有功能上完全等价。
采用单碱基编辑获得CD45.1表位的其他品系有独立的构建方式与背景（Laubreton et al., 2023）。这些工作可以帮助理解标记和背景效应，但其结果不能直接改写成本品系的构建方法。
应用领域
| 研究任务 | 可测终点 | 关键限制 |
|---|---|---|
| 造血细胞移植 | 供者相关细胞的比例、绝对数量及谱系组成 | 残余受者细胞、竞争者与检测门控会影响比例 |
| 竞争性造血重建 | 试验与竞争来源细胞随时间的相对贡献 | 需要匹配背景及对照竞争组，不能预设两种来源天然等价 |
| 免疫细胞过继转移 | 转移细胞的存留、扩增与组织分布 | 标记追踪不等同于功能验证；需结合细胞身份与效应读出 |
| 混合嵌合与来源分析 | 比较不同来源对各白细胞群的贡献 | CD45阴性群体不能沿用同一判定方式，采样与血液污染也需考虑 |
CD45.1不是适用于所有细胞的通用遗传荧光标签。成熟红细胞等不适合直接用该白细胞标记追踪，目标群体是否可靠表达CD45应先确认；也不能将CD45阳性比例直接当作所有移植细胞的总存活率。
功能表型与使用条件
| 观察内容 | 已有证据与条件 | 科研意义 |
|---|---|---|
| CD45.1抗原表达 | 可用等位特异性抗体与CD45.2区分 | 为来源检测提供条件，仍需单染及阴性对照 |
| 双标记状态 | CD45.1/CD45.2组合可在F1或特定实验设计中出现 | 双阳性不是自动等同于双细胞或染色失败，须结合基因型判断 |
| 竞争移植差异 | 特定B6.SJL与B6比较中观察到归巢、植入或重建差异 | 差异不能机械归因于被研究的额外基因（Waterstrat et al., 2010; Mercier et al., 2016） |
| 其他生理与免疫表现 | 受导入区段、细胞类型及实验情境影响 | 该工具不是全面无差异的健康对照，也不宜套用统一疾病症状 |
使用要点与模型局限
首先建立完整的来源设计表：明确供者、受者和竞争者的CD45标记，以及是否存在双标记F1。这样才能解释单阳性、双阳性与阴性群体，避免在不同实验阶段混用定义。
流式检测需用真实单染、荧光减一或其他与问题匹配的对照确定门控和补偿，并在活细胞、单细胞及目标细胞群中分析。本文的颜色示意只是检测标签，不是实际流式数据；不同仪器和抗体不能直接照搬示意图中的颜色或阈值。
竞争移植尤其需要区分“标记带来的可识别性”和“背景带来的竞争能力”。应设置同一竞争来源参与的对照竞争实验，或采用经过独立验证的背景与互换设计。把一个组的CD45.1比例较低直接解释成试验基因损害干细胞，可能遗漏本底差异。
短期外周血嵌合率不能替代长期多谱系重建；比例变化还可能来自另一群体的数量变化。依据问题联合查看绝对数量、采样组织、时间点及细胞谱系，再作功能结论。
参考论文
Waterstrat, A., Liang, Y., Swiderski, C. F., Shelton, B. J., & Van Zant, G. (2010). Congenic interval of CD45/Ly-5 congenic mice contains multiple genes that may influence hematopoietic stem cell engraftment. Blood, 115(2), 408–417. https://doi.org/10.1182/blood-2008-03-143370
Mercier, F. E., Sykes, D. B., & Scadden, D. T. (2016). Single targeted exon mutation creates a true congenic mouse for competitive hematopoietic stem cell transplantation: The C57BL/6-CD45.1STEM mouse. Stem Cell Reports, 6(6), 985–992. https://doi.org/10.1016/j.stemcr.2016.04.010
Laubreton, D., Djebali, S., Angleraux, C., Chain, B., Dubois, M., Henry, F., Leverrier, Y., Teixeira, M., Markossian, S., & Marvel, J. (2023). Generation of a C57BL/6J mouse strain expressing the CD45.1 epitope to improve hematopoietic stem cell engraftment and adoptive cell transfer experiments. Lab Animal, 52(12), 324–331. https://doi.org/10.1038/s41684-023-01275-1