OT-1 小鼠由墨尔本大学的 Francis R. Carbone 博士于 1994 年培育建立。该品系通过将含有重排 T 细胞受体 α 链(Tcra-V2、Tcra-Jα26)和 β 链(Tcrb-V5、Tcrb-Dβ2、Tcrb-Jβ2.6)的转基因构建物共同注射到 C57BL/6 囊胚中建成,首建鼠与 C57BL/6 回交稳定,后由 Michael J. Bevan 博士(华盛顿大学)引入杰克森实验室(JAX),定名 #003831。原始 TCR 序列分离自 OVA₂₅₇₋₂₆₄(SIINFEKL)特异性的 CD8⁺ T 细胞克隆 149.42。
该品系属于 TCR 转基因小鼠,黑色毛色,MHC 单倍型为 H-2ᵇ。其核心特征是 CD8⁺ T 细胞几乎全部(约 95%–98%)表达转基因 Vα2/Vβ5 TCR,特异性识别由 MHC I 类分子 H-2Kᵇ 呈递的卵清蛋白肽段 OVA₂₅₋₂₆₄(SIINFEKL),因此获得一大群抗原特异性均一、可同步响应的细胞毒性 T 淋巴细胞。主要特点包括:①胸腺 CD4:CD8 比例偏向 CD8,外周 CD8⁺ T 细胞数增加而 CD4⁺ T 细胞数显著降低;②因 TCR 多样性受限,品系整体呈一定程度的免疫缺陷;③脾脏肿大(脾肿大)随年龄增长更明显,杂合子 OT-I⁺/⁻ 可减轻该现象并延长寿命。
OT-1 小鼠是现代免疫学研究中应用最广的 CD8⁺ T 细胞工具小鼠之一,广泛用于 T 细胞发育与胸腺阳性/阴性选择、TCR-配体相互作用、抗原交叉呈递、外周耐受与自身免疫、疫苗效力评价,以及肿瘤免疫治疗(如 B16-OVA 黑色素瘤过继转移模型、免疫检查点抑制剂评价)。在免疫治疗转化研究中,OT-1 常作为抗原特异性 T 细胞来源,用于示踪 T 细胞激活、增殖、分化为效应/记忆细胞及耗竭的全过程。
项目 | 内容 |
常用简称 | OT-1(OT-I, OT1, OTI) |
品系类型 | 转基因(TCR 转基因) |
物种 | 小鼠(Mus musculus) |
毛色 | 黑色 |
毛色基因型 | a/a(非-agouti) |
MHC 单倍型 | H-2ᵇ |
染色体数 | 2n = 40 |
参考基因组品系 | C57BL/6J(GRCm39/mm39) |
转基因型 | Tg(TcraTcrb)1100Mjb(纯合可活可育) |
RRID | IMSR_JAX:003831 |
其他关键标识 | 转基因位点位于 3 号染色体;等位基因同义词:OT1、OT-I、OT-I TCR、OVA-tcr-I 等 |
捐赠者 | Francis R. Carbone(墨尔本大学);引入 JAX 由 Michael J. Bevan(华盛顿大学)完成 |
数据来源:JAX 品系详情页(#003831)、Charles River 品系目录、MGI:3054907、Australian PhenomeBank APB ID 1485
时间 | 事件 |
1994 | Carbone 等从 OVA₂₅₋₂₆₄ 特异性 CD8⁺ T 细胞克隆 149.42 中分离重排 TCR α/β 链基因,构建转基因质粒(Vα2-Jα26 / Vβ5-Dβ2-Jβ2.6) |
1994 | 将转基因质粒共同注射入 C57BL/6 囊胚,获得首建鼠;首建鼠与 C57BL/6 回交稳定 |
1994 | 原始文献发表:Hogquist KA, Jameson SC, Heath WR, Howard JL, Bevan MJ, Carbone FR. T cell receptor antagonist peptides induce positive selection. Cell 76(1):17–27 |
约1995–1996 | Michael J. Bevan 获得部分 OT-1 小鼠并送至杰克森实验室进行保存与分发 |
2002 | Charles River France 从沃尔特和伊丽莎·霍尔研究所(Walter and Eliza Hall Institute, Victoria, Australia)引入,建立 C57BL/6-Tg(TcraTcrb)1100Mjb/Crl 亚系 |
2018-07-27 | JAX 品系页面最后更新 |
至今 | JAX 与多家国内供应商(集萃药康、维通利华、鼠来宝等)均提供该品系;以活体、冻精、冻胚等多种形式保存 |
数据来源:JAX #003831 Development 章节、Charles River 品系说明、原始文献 Cell 1994
OT-1 为单一位点转基因插入,无独立亚系分化(JAX #003831 与 Charles River Crl 亚系遗传背景一致,仅繁殖/健康监测体系不同)。下表整理转基因与遗传背景关键信息:
项目 | 内容 |
转基因等位基因 | Tg(TcraTcrb)1100Mjb |
等位基因类型 | 转基因插入(Transgenic insertion) |
插入位点 | 3 号染色体(具体位点未公开) |
表达基因 | Tcra(TCR α 链,Vα2-Jα26 重排);Tcrb(TCR β 链,Vβ5-Dβ2-Jβ2.6 重排) |
表达调控元件 | α 链:H-2Kᵇ 启动子 + IgH 增强子 + 人 β-珠蛋白 3' 片段;β 链:内源性 Tcrb 启动子与编码区(基因组片段) |
转基因来源 | OVA₂₅₋₂₆₄ 特异性 CD8⁺ T 细胞克隆 149.42 |
遗传背景 | C57BL/6 同源近交(coisogenic),通过回交维持 |
纯合性 | 纯合子可活可育;纯合子和半合子均可与 C57BL/6J 繁育 |
繁育策略 | 纯合子 × 纯合子(JAX 推荐);或纯合 × C57BL/6J(维持背景) |
等位排除 | 转基因 TCR 表达导致等位排除,抑制内源性 TCR 重排;但约 2%–5% CD8⁺ T 细胞仍可发生内源性 α 链重排(受体编辑) |
MGI 登录号 | MGI:3054907 |
数据来源:JAX Genetics、APB Genetic Details、MGI 数据库
指标 | 数据 |
性成熟日龄 | 雌性 35–50 天;雄性 45–60 天(参考 C57BL/6J) |
初配日龄 | 雌性 6–8 周 / 雄性 8–10 周 |
繁殖寿命 | 约 7–9 个月(参考 C57BL/6J 种鼠淘汰周期) |
窝产仔数 | 平均 6–8 只(参考 C57BL/6J:6.98–7.48 只) |
离乳日龄 | 21 天 |
胎间隔 | 28–36 天 |
年产窝数 | 5–7 窝 |
配种方案 | 一雄多雌(1:2),纯合 × 纯合 |
性别比 | 约 1:1 |
妊娠期 | 19–21 天 |
特殊注意事项 | 纯合子可活可育;半合子亦可育;与 C57BL/6J 回交正常;老龄化纯合子可见脾肿大,建议需要高龄实验时考虑使用杂合子 OT-I⁺/⁻ |
数据来源:JAX #003831 育种须知、C57BL/6J 繁殖数据(维通利华、rjmart.cn)
OT-1 品系的基础体重增长沿用其 C57BL/6J 背景数据。OT-1 自身未见独立的体重曲线公开报告;下表为 C57BL/6J 参考值。
周龄 | 雄性 (g) | 雌性 (g) |
3 | 9–13 | 9–13 |
4 | 15–20 | 13–18 |
6 | 20–28 | 18–23 |
8 | 25–35 | 20–28 |
12 | 28–35 | 22–28 |
16 | 30–40 | 25–30 |
24(成年) | 35–40 | 28–32 |
数据来源:C57BL/6J 体重增长曲线(维通利华、杰克森实验室、rjmart.cn 综合参考值,区间形式给出)注:数值为典型范围,非 Mean ± SD,仅供 OT-1 选用时参考。OT-1 纯合子老龄化可见脾脏与体重增加(脾肿大),应结合实验设计判读。
指标 | 数据 |
平均寿命 | 约 18–24 个月(参考 C57BL/6J) |
中位生存期 | 约 24 个月(参考 C57BL/6J) |
最长寿命 | 约 28–30 个月(参考 C57BL/6J) |
老年界定 | ≥18 月龄 |
OT-1 特异性 | 纯合子 OT-I⁺/⁺ 老龄化可见脾肿大及寿命缩短;杂合子 OT-I⁺/⁻ 可减轻脾肿大并延长预期寿命,利于老年期抗原特异性 CD8⁺ T 细胞研究 |
数据来源:JAX #003831、Wiley Aging Cell 2025(OT-I⁺/⁻ 老龄化表型)、C57BL/6J 寿命数据
特征 | 描述 |
体型 | 与 C57BL/6J 一致:体型中等偏小,体格健壮,被毛光滑黑色 |
脾脏 | OT-1 纯合子随年龄增长可见脾肿大;杂合子脾肿大显著减轻;老年 OT-I⁺/⁻ 脾重仍低于成年 OT-I⁺/⁺ |
胸腺 | CD4:CD8 比例偏向 CD8;双阳性(DP)胸腺细胞经阳性选择后分化为 CD8⁺ 单阳性(SP) |
外周淋巴器官 | 脾脏和淋巴结 CD8⁺ T 细胞数显著增加(约 2 倍),CD4⁺ T 细胞数显著降低(9 周龄时可达 7 倍降低) |
眼球 | 继承 C57BL/6J 背景:约 12% 个体有眼睛缺损(白内障、小眼或无眼) |
其他器官 | 无 OT-1 特异性大体解剖异常报道 |
数据来源:JAX #003831、UNR 学位论文(OT-1 表型验证)、Aging Cell 2025、C57BL/6J 背景资料
OT-1 未公开独立的血清生化数据,以下为 C57BL/6J 背景参考值(SPF 级,8–12 周龄,Mean ± SD)。
参数 | 单位 | 雄性 | 雌性 |
葡萄糖 (GLU) | mmol/L | 9.2 ± 2.3 | 8.7 ± 1.9 |
尿素氮 (BUN) | mmol/L | 8.5 ± 1.2 | 8.2 ± 1.4 |
肌酐 (CREA) | µmol/L | 17.7 ± 3.1 | 15.9 ± 2.8 |
总蛋白 (TP) | g/L | 42.0 ± 3.0 | 41.0 ± 3.5 |
白蛋白 (ALB) | g/L | 25.5 ± 1.8 | 26.0 ± 2.0 |
谷丙转氨酶 (ALT) | U/L | 35.5 ± 12.0 | 32.0 ± 10.5 |
谷草转氨酶 (AST) | U/L | 110.0 ± 35.0 | 105.0 ± 30.0 |
碱性磷酸酶 (ALP) | U/L | 65.0 ± 18.0 | 70.0 ± 20.0 |
总胆红素 (TBIL) | µmol/L | 3.5 ± 1.0 | 3.2 ± 0.9 |
总胆固醇 (TC) | mmol/L | 2.5 ± 0.4 | 2.0 ± 0.3 |
甘油三酯 (TG) | mmol/L | 1.2 ± 0.3 | 1.0 ± 0.3 |
数据来源:C57BL/6J 血清生化参考值(Taconic、Charles River 生理数据表综合参考)注:OT-1 实际数值可能因 TCR 转基因免疫状态略有偏移,建议各实验室建立内部参考值。
OT-1 未公开独立血常规数据,以下为 C57BL/6J 背景参考值(Mean ± SD)。
红细胞系
参数 | 单位 | 雄性 | 雌性 |
红细胞计数 (RBC) | ×10¹²/L | 9.5 ± 0.6 | 9.3 ± 0.5 |
血红蛋白 (HGB) | g/L | 148 ± 12 | 144 ± 10 |
红细胞压积 (HCT) | % | 44.5 ± 3.0 | 43.0 ± 2.8 |
平均红细胞体积 (MCV) | fL | 47.0 ± 1.5 | 46.5 ± 1.4 |
平均红细胞血红蛋白 (MCH) | pg | 15.5 ± 0.5 | 15.4 ± 0.5 |
白细胞分类
参数 | 单位 | 雄性 | 雌性 |
白细胞计数 (WBC) | ×10⁹/L | 4.2 ± 1.0 | 3.8 ± 0.9 |
中性粒细胞 | % | 20.0 ± 5.0 | 18.0 ± 4.5 |
淋巴细胞 | % | 72.0 ± 6.0 | 74.0 ± 5.5 |
单核细胞 | % | 4.0 ± 1.2 | 4.2 ± 1.3 |
嗜酸性粒细胞 | % | 2.0 ± 0.8 | 2.0 ± 0.7 |
嗜碱性粒细胞 | % | 1.0 ± 0.5 | 1.0 ± 0.4 |
注:OT-1 因 CD4:CD8 比例偏向 CD8,淋巴细胞分类中 CD8⁺ 亚群显著增加,但总白细胞计数通常仍在 C57BL/6J 参考区间内。
血小板
参数 | 单位 | 雄性 | 雌性 |
血小板计数 (PLT) | ×10⁹/L | 600 ± 80 | 590 ± 75 |
平均血小板体积 (MPV) | fL | 5.5 ± 0.3 | 5.4 ± 0.3 |
数据来源:C57BL/6J 血常规参考值(Taconic、Charles River 综合参考)
OT-1 未公开独立器官重量数据,以下为 C57BL/6J 背景参考值(8–12 周龄,Mean ± SD,单位 g)。
器官 | 雄性 (g) | 雌性 (g) |
心 | 0.13 ± 0.02 | 0.11 ± 0.02 |
肝 | 1.35 ± 0.15 | 1.15 ± 0.12 |
脾 | 0.09 ± 0.02 | 0.08 ± 0.02 |
肺 | 0.18 ± 0.03 | 0.16 ± 0.03 |
肾(双侧) | 0.26 ± 0.04 | 0.22 ± 0.03 |
脑 | 0.46 ± 0.02 | 0.46 ± 0.02 |
睾丸(双侧) | 0.20 ± 0.02 | — |
胸腺 | 0.05 ± 0.01 | 0.05 ± 0.01 |
注:OT-1 老龄化纯合子可见脾肿大,脾重可能显著高于上表参考值。
参数 | 数值 |
心率 | 500–600 次/分(参考 C57BL/6J) |
呼吸频率 | 90–160 次/分 |
体温 | 36.5–37.5 ℃ |
血压 | 收缩压 110–120 mmHg;舒张压 70–85 mmHg |
基础代谢率 | 约 0.9–1.1 kcal/h(参考 C57BL/6J) |
特征 | 描述 |
一般活动 | 继承 C57BL/6J 背景:活动适中,夜间活跃 |
攻击性 | 同性群养偶有打斗(C57BL/6J 背景"理发行为"常见,尤其雌性) |
应激敏感性 | 中等(参考 C57BL/6J) |
认知能力 | 参考背景品系;中等强度社交挫败可增强年轻鼠(6–8 周)学习记忆 |
社会行为 | 与 C57BL/6J 一致 |
OT-1 特异性 | 暂无 OT-1 特异性行为学表型报道;其行为表现主要受背景品系决定 |
数据来源:C57BL/6 行为学综述(百度百科、JAX)
疾病类型 | 发生率 | 说明 |
脾肿大(纯合子老龄化) | 中–高 | OT-I⁺/⁺ 随年龄增长脾脏与体重进行性增加;杂合子 OT-I⁺/⁻ 显著减轻 |
免疫缺陷(继发感染风险) | 中 | TCR 转基因导致 T 细胞多样性受限,整体呈一定免疫缺陷;对病原体的多克隆 T 细胞应答能力降低 |
眼睛缺损 | ~12% | 继承 C57BL/6J 背景:白内障、小眼或无眼(雌仔鼠 16.8%,雄仔鼠 3%) |
腭裂 | 可诱导 | 可的松可诱发,发生率约 20%(C57BL/6J 背景) |
乳腺肿瘤 | 低 | 乳腺癌自然发生率低,化学物质难以诱发(C57BL/6J 背景) |
淋巴瘤 | 6% | 淋巴细胞性白血病自发率约 6%(C57BL/6J 背景) |
全身照射后淋巴瘤 | 90–100% | 全身照射后淋巴瘤发病率高(C57BL/6J 背景) |
听力退化 | 老年期 | 老年 C57BL/6J 可见听力退化(Cdh23ᵃʰl 背景) |
数据来源:JAX #003831、Aging Cell 2025、C57BL/6J 背景自发疾病资料⚠️ 免疫缺陷提示:OT-1 因 TCR 多样性受限呈一定免疫缺陷,饲养和实验中需严格 SPF 管理,注意机会性感染风险。
领域 | 具体应用 |
CD8⁺ T 细胞生物学 | 研究抗原特异性 CD8⁺ T 细胞的激活、增殖、分化为效应/记忆细胞及耗竭机制 |
胸腺选择 | 阳性选择与阴性选择机制;肽配体在 T 细胞发育中的作用 |
TCR-配体相互作用 | TCR 亲和力、激动剂/拮抗剂肽对 T 细胞激活阈值的调控 |
抗原交叉呈递 | 树突状细胞将外源抗原(如 OVA)加工后经 MHC I 呈递的机制研究 |
外周耐受与自身免疫 | 中枢与外周 T 细胞耐受;自身反应性 T 细胞的失能、删除与调节 |
感染免疫 | 用表达 OVA 的病原体(如 Lm-OVA、VACV-OVA)研究 CD8⁺ T 细胞对感染的应答动力学 |
疫苗评价 | 以 OVA 为模式抗原评价疫苗配方、佐剂与递送系统的 T 细胞免疫效力 |
肿瘤免疫治疗 | B16-OVA、E.G7-OVA、B16F10-OVA、MCA205-OVA 等模型过继转移,评价 CTL 抗瘤、免疫检查点抑制剂、细胞因子佐剂、T 细胞工程化(如 IL-12、CAR 类似策略)疗效 |
T 细胞示踪与迁移 | 用 CellTrace/CFSE 等荧光染料标记 OT-1 细胞,体内追踪增殖、迁移与组织分布 |
联合工具鼠策略 | 与 CD45.1/CD45.2、Thy1.1/Thy1.2、Rag1⁻/⁻、Foxp3-GFP、Rosa26-Cas9 等品系杂交,用于谱系追踪、基因编辑与免疫机制研究 |
模型名称 | 基因突变 | 研究领域 |
OT-1 CD45.1 Rosa26-Cas9(JAX #040288) | Tg(TcraTcrb)1100Mjb + Ptprcᵃ(CD45.1)+ Gt(ROSA)26Sorᵗᵐ¹.¹(CAG-cas9*,-EGFP) | 体内/体外基因敲除 CD8⁺ T 细胞应答追踪 |
OT-I RAGnull | Tg(TcraTcrb)1100Mjb + Rag1/2 敲除 | 完全排除内源性 TCR 重排,获得真正单克隆 CD8⁺ T 细胞群体 |
OT-I/K14-OVAp | OT-I × K14-OVAp(角质细胞表达 OVA 肽) | 自发性 CD8⁺ T 细胞依赖性自身免疫病模型 |
OT-I × LMP7⁻/⁻ | OT-I × 免疫蛋白酶体亚基 LMP7 敲除 | 免疫蛋白酶体在胸腺阳性选择中的作用 |
OT-I × SLAP⁻/⁻ | OT-I × SLAP 敲除 | TCR 亲和力与胸腺阴性选择、受体编辑研究 |
OT-1 × Foxp3-GFP | OT-I × Foxp3-GFP 报告 | 肿瘤引流淋巴结中 Treg 转化与 Th17 样细胞分化研究 |
OT-1 CD45.1/CD45.2 嵌合 | OT-I 与 CD45 同源异型品系配对 | 过继转移后供体/受体 T 细胞示踪与竞争性造血实验 |
OT-1 Thy1.1 | OT-I × Thy1.1 | 与 Thy1.2 受体配对用于流式/免疫组化区分供受体细胞 |
数据来源:JAX #040288、PubMed(Montaudouin 2010、Friend 2013、Clarke 2000 等)
管理要点 | 注意事项 |
设施等级 | SPF 级屏障设施饲养;因 OT-1 呈一定免疫缺陷,对机会性感染敏感,严禁降低等级 |
温度 | 20–26 ℃(建议 21 ± 2 ℃),日温差 ≤ 3 ℃ |
相对湿度 | 40–70%(建议 50–60%) |
光照 | 12 h 明 / 12 h 暗周期(建议 6:00–18:00 明) |
换气 | ≥ 10–20 次/小时,氨浓度 ≤ 20 ppm |
笼具 | IVC 笼盒为主;每只鼠 ≥ 100 cm² 地板面积,繁殖对/三鼠+窝 ≥ 500 cm² |
垫料 | 阔叶木刨花/锯末或玉米芯,使用前高压灭菌;禁用针叶木(松/杉/桧)以免芳香烃损伤肝细胞 |
饮水 | 高压灭菌后酸化水(pH 2.5–3.0);每周换水 2–3 次;水瓶/吸水管每次更换前清洗消毒 |
饲料 | 全价营养颗粒饲料(蛋白 14–20%,脂肪 4–6%);种鼠可补充葵花籽 0.5–1 g/d/只;SPF 级饲料需辐照或高压灭菌 |
采食/饮水量 | 成鼠采食约 3–7 g/d;饮水约 4–7 ml/d(参考 C57BL/6J) |
清洁卫生 | 每周至少 2 次更换垫料;笼具/食具每月彻底消毒 1 次;季度大消毒(0.2% 过氧乙酸喷雾) |
繁育 | 纯合 × 纯合(JAX 推荐)或纯合 × C57BL/6J;初配 6–10 周龄;种鼠淘汰 7–9 月龄 |
日常观察 | 食欲、精神、体毛、活动、粪便外观每日检查;老龄化鼠关注脾肿大体征(腹围、活动量) |
基因型鉴定 | PCR 鉴定 Tg(TcraTcrb)1100Mjb;JAX 提供标准 Genotyping Protocol;同时建议流式检测 CD8⁺ Vα2⁺Vβ5⁺ 比例(应 ≥ 95%)确认转基因表达稳定 |
特殊管理 | 老龄化纯合子脾肿大明显时,应考虑转用杂合子 OT-I⁺/⁻ 或降低实验周龄;新引进种群须隔离检疫无病后方可入群 |
数据来源:JAX #003831 育种须知、卡文斯 SPF 管理规范、biomart 小鼠饲养技巧
序号 | 文献 | 内容概述 |
1 | Hogquist KA, Jameson SC, Heath WR, Howard JL, Bevan MJ, Carbone FR. T cell receptor antagonist peptides induce positive selection. Cell. 1994;76(1):17-27. | OT-1 品系建立原始文献;首次报道转基因 TCR 识别 OVA₂₅₋₂₆₄/H-2Kᵇ 及其在阳性选择中的作用 |
2 | Clarke SRM et al. Characterization of the ovalbumin-specific TCR transgenic line OT-I. J Immunol. 2000. | OT-1 表型详细刻画:CD8⁺ Vα2⁺Vβ5⁺ 比例、CD4/CD8 比例偏向、外周 T 细胞数变化 |
3 | Montaudouin C et al. Endogenous TCR recombination in TCR Tg single RAG-deficient mice. PLoS One. 2010. | 揭示 TCR 转基因背景下内源性 TCR 重排的存在(含 OT-1 RAG 缺陷背景) |
4 | Friend SF et al. SLAP deficiency increases TCR avidity leading to altered repertoire and negative selection. Immunol Res. 2013. | OT-1 × SLAP⁻/⁻ 揭示 TCR 亲和力与阴性选择、受体编辑关系 |
5 | Ménétrier-Caux C et al. Heterozygous OT-I mice reveal antigen-specific CD8⁺ T cells shift from apoptotic to necrotic killers in the elderly. Aging Cell. 2025. | 杂合子 OT-I⁺/⁻ 减轻脾肿大、延长寿命,老年期 CD8⁺ T 细胞杀伤机制转变 |
6 | Carbone FR et al. Proteasomes shape the repertoire of T cells participating in antigen-specific immune responses. Eur J Immunol. 2005. | OT-1 × LMP7⁻/⁻ 揭示免疫蛋白酶体在阳性选择肽段生成中的作用 |
7 | Ohlen C et al. CD8 T cell tolerance to a tumor-associated antigen. 等 OT-1 肿瘤免疫系列研究 | OT-1 在 B16-OVA 等肿瘤模型中的耐受与过继治疗机制 |
8 | JAX Strain #003831 Datasheet | 品系详情、繁育策略、基因型鉴定方法等官方资料 |
9 | JAX Strain #040288 Datasheet | OT-1 CD45.1 Rosa26-Cas9 衍生品系资料 |
10 | BenchChem Technical Guide. OT-I and OT-II Mouse Models in Ovalbumin-Specific Immunity. 2026. | OT-I/OT-II 实验方法学与定量预期综合指南 |
声明:本资料整合自多个权威来源,仅供科研参考。具体实验方案请结合供应商最新技术资料和原始文献设计。