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OT-1 (OT1, OT-I)小鼠
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品系简介

OT-1 小鼠由墨尔本大学的 Francis R. Carbone 博士于 1994 年培育建立。该品系通过将含有重排 T 细胞受体 α 链(Tcra-V2、Tcra-Jα26)和 β 链(Tcrb-V5、Tcrb-Dβ2、Tcrb-Jβ2.6)的转基因构建物共同注射到 C57BL/6 囊胚中建成,首建鼠与 C57BL/6 回交稳定,后由 Michael J. Bevan 博士(华盛顿大学)引入杰克森实验室(JAX),定名 #003831。原始 TCR 序列分离自 OVA₂₅₇₋₂₆₄(SIINFEKL)特异性的 CD8⁺ T 细胞克隆 149.42。

该品系属于 TCR 转基因小鼠,黑色毛色,MHC 单倍型为 H-2ᵇ。其核心特征是 CD8⁺ T 细胞几乎全部(约 95%–98%)表达转基因 Vα2/Vβ5 TCR,特异性识别由 MHC I 类分子 H-2Kᵇ 呈递的卵清蛋白肽段 OVA₂₅₋₂₆₄(SIINFEKL),因此获得一大群抗原特异性均一、可同步响应的细胞毒性 T 淋巴细胞。主要特点包括:①胸腺 CD4:CD8 比例偏向 CD8,外周 CD8⁺ T 细胞数增加而 CD4⁺ T 细胞数显著降低;②因 TCR 多样性受限,品系整体呈一定程度的免疫缺陷;③脾脏肿大(脾肿大)随年龄增长更明显,杂合子 OT-I⁺/⁻ 可减轻该现象并延长寿命。

OT-1 小鼠是现代免疫学研究中应用最广的 CD8⁺ T 细胞工具小鼠之一,广泛用于 T 细胞发育与胸腺阳性/阴性选择、TCR-配体相互作用、抗原交叉呈递、外周耐受与自身免疫、疫苗效力评价,以及肿瘤免疫治疗(如 B16-OVA 黑色素瘤过继转移模型、免疫检查点抑制剂评价)。在免疫治疗转化研究中,OT-1 常作为抗原特异性 T 细胞来源,用于示踪 T 细胞激活、增殖、分化为效应/记忆细胞及耗竭的全过程。

一、品系基本信息

项目

内容

常用简称

OT-1(OT-I, OT1, OTI)

品系类型

转基因(TCR 转基因)

物种

小鼠(Mus musculus)

毛色

黑色

毛色基因型

a/a(非-agouti)

MHC 单倍型

H-2ᵇ

染色体数

2n = 40

参考基因组品系

C57BL/6J(GRCm39/mm39)

转基因型

Tg(TcraTcrb)1100Mjb(纯合可活可育)

RRID

IMSR_JAX:003831

其他关键标识

转基因位点位于 3 号染色体;等位基因同义词:OT1、OT-I、OT-I TCR、OVA-tcr-I 等

捐赠者

Francis R. Carbone(墨尔本大学);引入 JAX 由 Michael J. Bevan(华盛顿大学)完成

数据来源:JAX 品系详情页(#003831)、Charles River 品系目录、MGI:3054907、Australian PhenomeBank APB ID 1485

二、品系来源与培育历史

时间

事件

1994

Carbone 等从 OVA₂₅₋₂₆₄ 特异性 CD8⁺ T 细胞克隆 149.42 中分离重排 TCR α/β 链基因,构建转基因质粒(Vα2-Jα26 / Vβ5-Dβ2-Jβ2.6)

1994

将转基因质粒共同注射入 C57BL/6 囊胚,获得首建鼠;首建鼠与 C57BL/6 回交稳定

1994

原始文献发表:Hogquist KA, Jameson SC, Heath WR, Howard JL, Bevan MJ, Carbone FR. T cell receptor antagonist peptides induce positive selection. Cell 76(1):17–27

约1995–1996

Michael J. Bevan 获得部分 OT-1 小鼠并送至杰克森实验室进行保存与分发

2002

Charles River France 从沃尔特和伊丽莎·霍尔研究所(Walter and Eliza Hall Institute, Victoria, Australia)引入,建立 C57BL/6-Tg(TcraTcrb)1100Mjb/Crl 亚系

2018-07-27

JAX 品系页面最后更新

至今

JAX 与多家国内供应商(集萃药康、维通利华、鼠来宝等)均提供该品系;以活体、冻精、冻胚等多种形式保存

数据来源:JAX #003831 Development 章节、Charles River 品系说明、原始文献 Cell 1994

三、遗传信息

OT-1 为单一位点转基因插入,无独立亚系分化(JAX #003831 与 Charles River Crl 亚系遗传背景一致,仅繁殖/健康监测体系不同)。下表整理转基因与遗传背景关键信息:

项目

内容

转基因等位基因

Tg(TcraTcrb)1100Mjb

等位基因类型

转基因插入(Transgenic insertion)

插入位点

3 号染色体(具体位点未公开)

表达基因

Tcra(TCR α 链,Vα2-Jα26 重排);Tcrb(TCR β 链,Vβ5-Dβ2-Jβ2.6 重排)

表达调控元件

α 链:H-2Kᵇ 启动子 + IgH 增强子 + 人 β-珠蛋白 3' 片段;β 链:内源性 Tcrb 启动子与编码区(基因组片段)

转基因来源

OVA₂₅₋₂₆₄ 特异性 CD8⁺ T 细胞克隆 149.42

遗传背景

C57BL/6 同源近交(coisogenic),通过回交维持

纯合性

纯合子可活可育;纯合子和半合子均可与 C57BL/6J 繁育

繁育策略

纯合子 × 纯合子(JAX 推荐);或纯合 × C57BL/6J(维持背景)

等位排除

转基因 TCR 表达导致等位排除,抑制内源性 TCR 重排;但约 2%–5% CD8⁺ T 细胞仍可发生内源性 α 链重排(受体编辑)

MGI 登录号

MGI:3054907

数据来源:JAX Genetics、APB Genetic Details、MGI 数据库

四、繁殖性能

指标

数据

性成熟日龄

雌性 35–50 天;雄性 45–60 天(参考 C57BL/6J)

初配日龄

雌性 6–8 周 / 雄性 8–10 周

繁殖寿命

约 7–9 个月(参考 C57BL/6J 种鼠淘汰周期)

窝产仔数

平均 6–8 只(参考 C57BL/6J:6.98–7.48 只)

离乳日龄

21 天

胎间隔

28–36 天

年产窝数

5–7 窝

配种方案

一雄多雌(1:2),纯合 × 纯合

性别比

约 1:1

妊娠期

19–21 天

特殊注意事项

纯合子可活可育;半合子亦可育;与 C57BL/6J 回交正常;老龄化纯合子可见脾肿大,建议需要高龄实验时考虑使用杂合子 OT-I⁺/⁻

数据来源:JAX #003831 育种须知、C57BL/6J 繁殖数据(维通利华、rjmart.cn)

五、生长数据(体重增长曲线)

OT-1 品系的基础体重增长沿用其 C57BL/6J 背景数据。OT-1 自身未见独立的体重曲线公开报告;下表为 C57BL/6J 参考值。

周龄

雄性 (g)

雌性 (g)

3

9–13

9–13

4

15–20

13–18

6

20–28

18–23

8

25–35

20–28

12

28–35

22–28

16

30–40

25–30

24(成年)

35–40

28–32

数据来源:C57BL/6J 体重增长曲线(维通利华、杰克森实验室、rjmart.cn 综合参考值,区间形式给出)注:数值为典型范围,非 Mean ± SD,仅供 OT-1 选用时参考。OT-1 纯合子老龄化可见脾脏与体重增加(脾肿大),应结合实验设计判读。

六、寿命

指标

数据

平均寿命

约 18–24 个月(参考 C57BL/6J)

中位生存期

约 24 个月(参考 C57BL/6J)

最长寿命

约 28–30 个月(参考 C57BL/6J)

老年界定

≥18 月龄

OT-1 特异性

纯合子 OT-I⁺/⁺ 老龄化可见脾肿大及寿命缩短;杂合子 OT-I⁺/⁻ 可减轻脾肿大并延长预期寿命,利于老年期抗原特异性 CD8⁺ T 细胞研究

数据来源:JAX #003831、Wiley Aging Cell 2025(OT-I⁺/⁻ 老龄化表型)、C57BL/6J 寿命数据

七、解剖学特征

特征

描述

体型

与 C57BL/6J 一致:体型中等偏小,体格健壮,被毛光滑黑色

脾脏

OT-1 纯合子随年龄增长可见脾肿大;杂合子脾肿大显著减轻;老年 OT-I⁺/⁻ 脾重仍低于成年 OT-I⁺/⁺

胸腺

CD4:CD8 比例偏向 CD8;双阳性(DP)胸腺细胞经阳性选择后分化为 CD8⁺ 单阳性(SP)

外周淋巴器官

脾脏和淋巴结 CD8⁺ T 细胞数显著增加(约 2 倍),CD4⁺ T 细胞数显著降低(9 周龄时可达 7 倍降低)

眼球

继承 C57BL/6J 背景:约 12% 个体有眼睛缺损(白内障、小眼或无眼)

其他器官

无 OT-1 特异性大体解剖异常报道

数据来源:JAX #003831、UNR 学位论文(OT-1 表型验证)、Aging Cell 2025、C57BL/6J 背景资料

八、生理生化指标

8.1 血清生化指标

OT-1 未公开独立的血清生化数据,以下为 C57BL/6J 背景参考值(SPF 级,8–12 周龄,Mean ± SD)。

参数

单位

雄性

雌性

葡萄糖 (GLU)

mmol/L

9.2 ± 2.3

8.7 ± 1.9

尿素氮 (BUN)

mmol/L

8.5 ± 1.2

8.2 ± 1.4

肌酐 (CREA)

µmol/L

17.7 ± 3.1

15.9 ± 2.8

总蛋白 (TP)

g/L

42.0 ± 3.0

41.0 ± 3.5

白蛋白 (ALB)

g/L

25.5 ± 1.8

26.0 ± 2.0

谷丙转氨酶 (ALT)

U/L

35.5 ± 12.0

32.0 ± 10.5

谷草转氨酶 (AST)

U/L

110.0 ± 35.0

105.0 ± 30.0

碱性磷酸酶 (ALP)

U/L

65.0 ± 18.0

70.0 ± 20.0

总胆红素 (TBIL)

µmol/L

3.5 ± 1.0

3.2 ± 0.9

总胆固醇 (TC)

mmol/L

2.5 ± 0.4

2.0 ± 0.3

甘油三酯 (TG)

mmol/L

1.2 ± 0.3

1.0 ± 0.3

数据来源:C57BL/6J 血清生化参考值(Taconic、Charles River 生理数据表综合参考)注:OT-1 实际数值可能因 TCR 转基因免疫状态略有偏移,建议各实验室建立内部参考值。

8.2 血常规指标

OT-1 未公开独立血常规数据,以下为 C57BL/6J 背景参考值(Mean ± SD)。

红细胞系

参数

单位

雄性

雌性

红细胞计数 (RBC)

×10¹²/L

9.5 ± 0.6

9.3 ± 0.5

血红蛋白 (HGB)

g/L

148 ± 12

144 ± 10

红细胞压积 (HCT)

%

44.5 ± 3.0

43.0 ± 2.8

平均红细胞体积 (MCV)

fL

47.0 ± 1.5

46.5 ± 1.4

平均红细胞血红蛋白 (MCH)

pg

15.5 ± 0.5

15.4 ± 0.5

白细胞分类

参数

单位

雄性

雌性

白细胞计数 (WBC)

×10⁹/L

4.2 ± 1.0

3.8 ± 0.9

中性粒细胞

%

20.0 ± 5.0

18.0 ± 4.5

淋巴细胞

%

72.0 ± 6.0

74.0 ± 5.5

单核细胞

%

4.0 ± 1.2

4.2 ± 1.3

嗜酸性粒细胞

%

2.0 ± 0.8

2.0 ± 0.7

嗜碱性粒细胞

%

1.0 ± 0.5

1.0 ± 0.4

注:OT-1 因 CD4:CD8 比例偏向 CD8,淋巴细胞分类中 CD8⁺ 亚群显著增加,但总白细胞计数通常仍在 C57BL/6J 参考区间内。

血小板

参数

单位

雄性

雌性

血小板计数 (PLT)

×10⁹/L

600 ± 80

590 ± 75

平均血小板体积 (MPV)

fL

5.5 ± 0.3

5.4 ± 0.3

数据来源:C57BL/6J 血常规参考值(Taconic、Charles River 综合参考)

8.3 器官重量

OT-1 未公开独立器官重量数据,以下为 C57BL/6J 背景参考值(8–12 周龄,Mean ± SD,单位 g)。

器官

雄性 (g)

雌性 (g)

0.13 ± 0.02

0.11 ± 0.02

1.35 ± 0.15

1.15 ± 0.12

0.09 ± 0.02

0.08 ± 0.02

0.18 ± 0.03

0.16 ± 0.03

肾(双侧)

0.26 ± 0.04

0.22 ± 0.03

0.46 ± 0.02

0.46 ± 0.02

睾丸(双侧)

0.20 ± 0.02

胸腺

0.05 ± 0.01

0.05 ± 0.01

注:OT-1 老龄化纯合子可见脾肿大,脾重可能显著高于上表参考值。

8.4 其他生理参数

参数

数值

心率

500–600 次/分(参考 C57BL/6J)

呼吸频率

90–160 次/分

体温

36.5–37.5 ℃

血压

收缩压 110–120 mmHg;舒张压 70–85 mmHg

基础代谢率

约 0.9–1.1 kcal/h(参考 C57BL/6J)

九、行为学特征

特征

描述

一般活动

继承 C57BL/6J 背景:活动适中,夜间活跃

攻击性

同性群养偶有打斗(C57BL/6J 背景"理发行为"常见,尤其雌性)

应激敏感性

中等(参考 C57BL/6J)

认知能力

参考背景品系;中等强度社交挫败可增强年轻鼠(6–8 周)学习记忆

社会行为

与 C57BL/6J 一致

OT-1 特异性

暂无 OT-1 特异性行为学表型报道;其行为表现主要受背景品系决定

数据来源:C57BL/6 行为学综述(百度百科、JAX)

十、常见自发疾病

疾病类型

发生率

说明

脾肿大(纯合子老龄化)

中–高

OT-I⁺/⁺ 随年龄增长脾脏与体重进行性增加;杂合子 OT-I⁺/⁻ 显著减轻

免疫缺陷(继发感染风险)

TCR 转基因导致 T 细胞多样性受限,整体呈一定免疫缺陷;对病原体的多克隆 T 细胞应答能力降低

眼睛缺损

~12%

继承 C57BL/6J 背景:白内障、小眼或无眼(雌仔鼠 16.8%,雄仔鼠 3%)

腭裂

可诱导

可的松可诱发,发生率约 20%(C57BL/6J 背景)

乳腺肿瘤

乳腺癌自然发生率低,化学物质难以诱发(C57BL/6J 背景)

淋巴瘤

6%

淋巴细胞性白血病自发率约 6%(C57BL/6J 背景)

全身照射后淋巴瘤

90–100%

全身照射后淋巴瘤发病率高(C57BL/6J 背景)

听力退化

老年期

老年 C57BL/6J 可见听力退化(Cdh23ᵃʰl 背景)

数据来源:JAX #003831、Aging Cell 2025、C57BL/6J 背景自发疾病资料⚠️ 免疫缺陷提示:OT-1 因 TCR 多样性受限呈一定免疫缺陷,饲养和实验中需严格 SPF 管理,注意机会性感染风险。

十一、应用领域

领域

具体应用

CD8⁺ T 细胞生物学

研究抗原特异性 CD8⁺ T 细胞的激活、增殖、分化为效应/记忆细胞及耗竭机制

胸腺选择

阳性选择与阴性选择机制;肽配体在 T 细胞发育中的作用

TCR-配体相互作用

TCR 亲和力、激动剂/拮抗剂肽对 T 细胞激活阈值的调控

抗原交叉呈递

树突状细胞将外源抗原(如 OVA)加工后经 MHC I 呈递的机制研究

外周耐受与自身免疫

中枢与外周 T 细胞耐受;自身反应性 T 细胞的失能、删除与调节

感染免疫

用表达 OVA 的病原体(如 Lm-OVA、VACV-OVA)研究 CD8⁺ T 细胞对感染的应答动力学

疫苗评价

以 OVA 为模式抗原评价疫苗配方、佐剂与递送系统的 T 细胞免疫效力

肿瘤免疫治疗

B16-OVA、E.G7-OVA、B16F10-OVA、MCA205-OVA 等模型过继转移,评价 CTL 抗瘤、免疫检查点抑制剂、细胞因子佐剂、T 细胞工程化(如 IL-12、CAR 类似策略)疗效

T 细胞示踪与迁移

用 CellTrace/CFSE 等荧光染料标记 OT-1 细胞,体内追踪增殖、迁移与组织分布

联合工具鼠策略

与 CD45.1/CD45.2、Thy1.1/Thy1.2、Rag1⁻/⁻、Foxp3-GFP、Rosa26-Cas9 等品系杂交,用于谱系追踪、基因编辑与免疫机制研究

十二、相关基因修饰模型(若适用)

模型名称

基因突变

研究领域

OT-1 CD45.1 Rosa26-Cas9(JAX #040288)

Tg(TcraTcrb)1100Mjb + Ptprcᵃ(CD45.1)+ Gt(ROSA)26Sorᵗᵐ¹.¹(CAG-cas9*,-EGFP)

体内/体外基因敲除 CD8⁺ T 细胞应答追踪

OT-I RAGnull

Tg(TcraTcrb)1100Mjb + Rag1/2 敲除

完全排除内源性 TCR 重排,获得真正单克隆 CD8⁺ T 细胞群体

OT-I/K14-OVAp

OT-I × K14-OVAp(角质细胞表达 OVA 肽)

自发性 CD8⁺ T 细胞依赖性自身免疫病模型

OT-I × LMP7⁻/⁻

OT-I × 免疫蛋白酶体亚基 LMP7 敲除

免疫蛋白酶体在胸腺阳性选择中的作用

OT-I × SLAP⁻/⁻

OT-I × SLAP 敲除

TCR 亲和力与胸腺阴性选择、受体编辑研究

OT-1 × Foxp3-GFP

OT-I × Foxp3-GFP 报告

肿瘤引流淋巴结中 Treg 转化与 Th17 样细胞分化研究

OT-1 CD45.1/CD45.2 嵌合

OT-I 与 CD45 同源异型品系配对

过继转移后供体/受体 T 细胞示踪与竞争性造血实验

OT-1 Thy1.1

OT-I × Thy1.1

与 Thy1.2 受体配对用于流式/免疫组化区分供受体细胞

数据来源:JAX #040288、PubMed(Montaudouin 2010、Friend 2013、Clarke 2000 等)

十三、饲养管理要点

管理要点

注意事项

设施等级

SPF 级屏障设施饲养;因 OT-1 呈一定免疫缺陷,对机会性感染敏感,严禁降低等级

温度

20–26 ℃(建议 21 ± 2 ℃),日温差 ≤ 3 ℃

相对湿度

40–70%(建议 50–60%)

光照

12 h 明 / 12 h 暗周期(建议 6:00–18:00 明)

换气

≥ 10–20 次/小时,氨浓度 ≤ 20 ppm

笼具

IVC 笼盒为主;每只鼠 ≥ 100 cm² 地板面积,繁殖对/三鼠+窝 ≥ 500 cm²

垫料

阔叶木刨花/锯末或玉米芯,使用前高压灭菌;禁用针叶木(松/杉/桧)以免芳香烃损伤肝细胞

饮水

高压灭菌后酸化水(pH 2.5–3.0);每周换水 2–3 次;水瓶/吸水管每次更换前清洗消毒

饲料

全价营养颗粒饲料(蛋白 14–20%,脂肪 4–6%);种鼠可补充葵花籽 0.5–1 g/d/只;SPF 级饲料需辐照或高压灭菌

采食/饮水量

成鼠采食约 3–7 g/d;饮水约 4–7 ml/d(参考 C57BL/6J)

清洁卫生

每周至少 2 次更换垫料;笼具/食具每月彻底消毒 1 次;季度大消毒(0.2% 过氧乙酸喷雾)

繁育

纯合 × 纯合(JAX 推荐)或纯合 × C57BL/6J;初配 6–10 周龄;种鼠淘汰 7–9 月龄

日常观察

食欲、精神、体毛、活动、粪便外观每日检查;老龄化鼠关注脾肿大体征(腹围、活动量)

基因型鉴定

PCR 鉴定 Tg(TcraTcrb)1100Mjb;JAX 提供标准 Genotyping Protocol;同时建议流式检测 CD8⁺ Vα2⁺Vβ5⁺ 比例(应 ≥ 95%)确认转基因表达稳定

特殊管理

老龄化纯合子脾肿大明显时,应考虑转用杂合子 OT-I⁺/⁻ 或降低实验周龄;新引进种群须隔离检疫无病后方可入群

数据来源:JAX #003831 育种须知、卡文斯 SPF 管理规范、biomart 小鼠饲养技巧

十四、关键参考文献

序号

文献

内容概述

1

Hogquist KA, Jameson SC, Heath WR, Howard JL, Bevan MJ, Carbone FR. T cell receptor antagonist peptides induce positive selection. Cell. 1994;76(1):17-27.

OT-1 品系建立原始文献;首次报道转基因 TCR 识别 OVA₂₅₋₂₆₄/H-2Kᵇ 及其在阳性选择中的作用

2

Clarke SRM et al. Characterization of the ovalbumin-specific TCR transgenic line OT-I. J Immunol. 2000.

OT-1 表型详细刻画:CD8⁺ Vα2⁺Vβ5⁺ 比例、CD4/CD8 比例偏向、外周 T 细胞数变化

3

Montaudouin C et al. Endogenous TCR recombination in TCR Tg single RAG-deficient mice. PLoS One. 2010.

揭示 TCR 转基因背景下内源性 TCR 重排的存在(含 OT-1 RAG 缺陷背景)

4

Friend SF et al. SLAP deficiency increases TCR avidity leading to altered repertoire and negative selection. Immunol Res. 2013.

OT-1 × SLAP⁻/⁻ 揭示 TCR 亲和力与阴性选择、受体编辑关系

5

Ménétrier-Caux C et al. Heterozygous OT-I mice reveal antigen-specific CD8⁺ T cells shift from apoptotic to necrotic killers in the elderly. Aging Cell. 2025.

杂合子 OT-I⁺/⁻ 减轻脾肿大、延长寿命,老年期 CD8⁺ T 细胞杀伤机制转变

6

Carbone FR et al. Proteasomes shape the repertoire of T cells participating in antigen-specific immune responses. Eur J Immunol. 2005.

OT-1 × LMP7⁻/⁻ 揭示免疫蛋白酶体在阳性选择肽段生成中的作用

7

Ohlen C et al. CD8 T cell tolerance to a tumor-associated antigen. 等 OT-1 肿瘤免疫系列研究

OT-1 在 B16-OVA 等肿瘤模型中的耐受与过继治疗机制

8

JAX Strain #003831 Datasheet

品系详情、繁育策略、基因型鉴定方法等官方资料

9

JAX Strain #040288 Datasheet

OT-1 CD45.1 Rosa26-Cas9 衍生品系资料

10

BenchChem Technical Guide. OT-I and OT-II Mouse Models in Ovalbumin-Specific Immunity. 2026.

OT-I/OT-II 实验方法学与定量预期综合指南

声明:本资料整合自多个权威来源,仅供科研参考。具体实验方案请结合供应商最新技术资料和原始文献设计。



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繁育方式
未知
品牌
鼠来宝
声明
仅用于科学研究,不得用于临床诊断或治疗
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