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产品信息
品系全称 | C57BL/6-Tg(Pf4-icre)Q3Rsko/J |
鼠来宝品系编号 | YDS0352 |
品系背景 | C57BL/6 |
常用名 | Pf4-Cre；Cxcl4-iCre |
NCBI ID | 56744 |
基因名 | platelet factor 4 |
基因位置 | 5号染色体 |
基因表达 | cre,cre recombinase,bacteriophage P1 |
表达部位 | 绝大多数巨核细胞可见Cre，部分造血干细胞 |
构建方案
Pf4基因有3个转录本。根据Pf4基因的结构，选择Pf4-201(ENSMUST00000031320.7)作为推荐策略。Pf4-201基因有3个外显子，ATG起始密码子位于exon1, TAG终止密码子位于exon3。我们通过CRISPR/Cas9系统制作Pf4-P2A-iCre敲入小鼠。Cas9 mRNA、sgRNA和供体将共同注射到受精卵中。sgRNA直接切割Pf4基因的Cas9内切酶近终止密码子(TAG)，形成DSB(双链断裂)。这种断裂会被修复，通过同源重组导致Pf4基因的停止密码子(TAG)前的P2A。幼崽将通过PCR进行基因分型，然后进行序列分析。
图1 Pf4-Cre小鼠模型构建
保种方式
活体保种，保种基因型为非转基因携带者×半合子。当维持一个活群体时，可以将杂合小鼠与来自群体里的野生型小鼠或C57BL/6J 近交小鼠一起繁殖。或者，可以将纯合小鼠一起繁殖，纯合子是可行的和可育的。
4. 生殖泄露
5. 研究应用
研究方向及表型：
工具鼠（研究巨核生成、血小板形成和血小板功能的重要工具。）
具体内容及相关参考文献：
将Pf4-Cre小鼠Q3品系与ROSA26-lacZ报告品系杂交，结果表明cre -重组酶的活性仅限于巨核细胞。该品系代表了产生巨核细胞谱系限制特异性靶向突变体的有效工具。
Tiedt R , et al. Pf4-Cre transgenic mice allow the generation of lineage-restricted gene knockouts for studying megakaryocyte and platelet function in vivo.