SMMHC-CreERT2 小鼠是一种基因工程小鼠品系，其 CreERT2 重组酶 的表达受 SMMHC 启动子（Smooth Muscle Myosin Heavy Chain, 平滑肌肌球蛋白重链基因，也称 Myh11）控制，主要用于平滑肌细胞特异性的条件性基因编辑研究。

特点与功能

1.SMMHC 启动子驱动 Cre 表达

•**SMMHC 基因（Myh11）**是平滑肌细胞特异性表达的基因。

•该启动子驱动 CreERT2 在成熟的平滑肌细胞中表达，适用于研究已分化的平滑肌细胞相关基因功能。

2.ERT2 系统的时间可控性

•CreERT2 融合蛋白包含 Cre 重组酶和改良的雌激素受体（ERT2）。

•在正常条件下，CreERT2 位于细胞质中，处于非活性状态。

•在给予tamoxifen（TAM）后，ERT2 结合激动剂进入细胞核，激活 Cre 重组酶，实现loxP 位点之间的重组。

3.空间和时间特异性

•在成熟平滑肌细胞中特异性表达，同时可通过 tamoxifen 控制基因重组的时间，实现时空特异性基因编辑。

主要研究应用

1.血管和心血管疾病研究

•研究血管平滑肌细胞在动脉粥样硬化、血管损伤修复、再狭窄和动脉瘤形成中的作用。

•分析平滑肌细胞对动脉硬化和重塑的贡献。

2.呼吸道和消化道疾病研究

•研究气管、支气管和胃肠道等内脏平滑肌功能障碍相关的基因机制，如哮喘或肠道蠕动异常。

3.肿瘤生物学研究

•研究与平滑肌来源肿瘤（如平滑肌肉瘤）相关的基因突变和肿瘤微环境中平滑肌细胞的作用。

4.再生医学与干细胞研究

•在血管损伤修复过程中，通过条件性基因敲除研究干细胞或平滑肌细胞对组织再生的调控作用。

5.药物筛选和治疗靶点分析

•用于开发针对平滑肌相关疾病的新药筛选模型或验证治疗靶点。

实验操作与注意事项

1.基因型验证

•使用 PCR 检测小鼠是否携带 SMMHC-CreERT2 和目标基因的 loxP 位点。

2.Tamoxifen 诱导基因编辑

•剂量：通常 75–100 mg/kg，通过口服或腹腔注射给药。

•时机控制：根据实验需要，精确控制给药时间点（如出生后或成年期）。

•激活窗口：Cre 活性通常在给药后 24–48 小时内被诱导。

3.组织特异性验证

•使用报告基因（如 Rosa26-LacZ 或 EYFP）示踪 Cre 重组酶活性，确保基因编辑严格限制在平滑肌细胞中。

4.背景品系与影响

•常用遗传背景为 C57BL/6，但实验结果可能受到遗传背景差异的影响，因此需要注意基因型一致性。

5.实验设计与对照组设置

•包括 tamoxifen 未处理组和野生型对照组，确保基因编辑的特异性和结果的可重复性。

应用示例

1.动脉粥样硬化模型

•敲除平滑肌中特定基因（如 Akt、TGF-β 或 Notch3），研究其对血管病变和重塑过程的影响。

2.血管损伤修复研究

•在血管损伤后诱导基因重组，分析平滑肌细胞迁移和增殖机制。

3.肿瘤发生机制研究

•特异性敲除肿瘤抑制基因或激活癌基因，模拟平滑肌肉瘤等肿瘤的发生发展过程。

4.器官功能和蠕动异常研究

•研究肠道蠕动障碍或呼吸道平滑肌异常功能（如哮喘）的病理机制。