Sftpc-CreERT2 小鼠是一种条件性基因编辑小鼠品系，其 CreERT2 重组酶 的表达受 Sftpc 基因启动子（Surfactant Protein C，肺表面活性蛋白 C）控制，主要用于研究肺泡 II 型上皮细胞的基因功能和肺部疾病模型。

特点与功能

1.Sftpc 启动子驱动 Cre 表达

•Sftpc 基因在肺泡 II 型上皮细胞 (AT2) 中特异性表达。

•AT2 细胞是肺泡内的表面活性物质分泌细胞，同时也充当肺组织干细胞，在损伤修复和再生过程中起关键作用。

•因此，Sftpc-CreERT2 小鼠适用于研究与 AT2 细胞相关的基因功能及肺部发育、修复和疾病机制。

2.ERT2 系统的时间可控性

•CreERT2 是一个融合蛋白，由 Cre 重组酶和改良的雌激素受体 (ERT2) 构成。

•在没有激动剂（如 tamoxifen）时，CreERT2 保持非活性状态，位于细胞质中。

•在给予 tamoxifen 后，CreERT2 激活并进入细胞核，触发 loxP 位点介导的重组事件，实现特定基因敲除或激活。

3.空间和时间特异性

•在肺泡 II 型上皮细胞中特异性表达，同时可通过 tamoxifen 控制基因重组的时间，实现时空特异性基因编辑。

主要研究应用

1.肺部发育与再生研究

•研究 AT2 细胞在肺泡发育和成熟过程中的作用，以及它们在肺损伤修复和再生中的贡献。

2.肺部疾病模型

•肺纤维化：分析 AT2 细胞在肺纤维化发生和进展过程中的作用，例如 IPF（特发性肺纤维化）。

•肺癌模型：研究肺腺癌或其他肺癌相关基因突变在 AT2 细胞中的功能，以及肿瘤的起始和进展机制。

•肺损伤和修复模型：模拟肺损伤后 AT2 细胞的增殖、迁移和修复过程。

3.基因功能分析

•在肺泡 II 型上皮细胞中特异性敲除或激活特定基因，以探索基因在细胞分化、增殖和信号通路中的作用。

4.肺部炎症和免疫反应研究

•分析 AT2 细胞如何调节肺泡微环境中的炎症反应和免疫功能。

实验操作与注意事项

1.基因型验证

•通过 PCR 检测 Sftpc-CreERT2 小鼠的基因型，确认 Cre 和目标基因携带情况。

2.Tamoxifen 诱导基因重组

•剂量：75–100 mg/kg，通常通过口服或腹腔注射给药。

•激活时机：根据实验需求精确控制给药时间，诱导基因重组的窗口期为 24–48 小时。

3.组织特异性验证

•使用报告基因（如 Rosa26-LacZ 或 EYFP）示踪 Cre 重组酶的活性，验证基因编辑是否严格局限于 AT2 细胞中。

4.实验背景与对照设计

•设置未使用 tamoxifen 的对照组，以及野生型对照组，以确保特异性结果的可靠性。

5.基因功能验证

•使用免疫荧光染色、RT-PCR 或 Western blot 检测靶基因敲除或激活的效率和特异性。

应用示例

1.肺纤维化研究

•敲除 AT2 细胞中的 TGF-β 或其他相关基因，以研究纤维化机制。

2.肺癌模型构建

•在 AT2 细胞中激活致癌基因（如 KRAS 或 TP53 突变），研究肺腺癌的发生和进展。

3.肺损伤修复机制

•敲除参与细胞增殖或迁移的关键基因，分析肺泡 II 型细胞在修复过程中如何发挥作用。

4.肺发育调控研究

•分析胚胎期或成年期 AT2 细胞中关键基因的功能及其在肺组织成熟和功能维持中的作用。

总结

Sftpc-CreERT2 小鼠是研究肺泡 II 型上皮细胞的理想工具，广泛应用于肺部疾病建模、发育研究和基因功能分析。其时空特异性的基因编辑能力，使其在研究肺损伤修复、肺纤维化及肺癌等方面具有显著优势。如果需要进一步的实验设计或技术指导，可以随时讨论详细方案！