产品信息
品系全称 | B6.129-Tac2tm1.1(cre)Qima/J |
鼠来宝品系编号 | YDS0230 |
品系背景 | C57BL/6 |
常用名 | Tac2-cre |
NCBI ID | 未知 |
基因名 | tachykinin 2 |
基因位置 | 10号染色体 |
基因表达 | cre,cre recombinase,bacteriophage P1 |
表达部位 | 背根神经节、脊髓背角以及嗅球、大脑皮层、杏仁核、海马、缰核、下丘脑和小脑等大脑的许多部位 |
构建方案
在靶向载体中,将Cre和一个新霉素选择盒插入Tac2的第一个编码外显子3。在新霉素选择盒中加入FRT位点,之后通过flipase介导的DNA重组去除这些位点。129个/Sv胚胎干细胞经电穿孔后,利用Southern blot技术筛选出192个通过遗传霉素筛选存活的克隆,鉴定出9个正确定位的克隆。用限制性内切酶XbaI对基因组DNA进行酶切,得到野生型等位基因的一个12kb片段,以及Tac2-Cre突变型等位基因的两个不同的7kb片段,这取决于使用的是5'或3'臂外探针(图1)。用两株阳性细胞株进行囊胚注射,得到的嵌合体小鼠与C57BL6野生型小鼠杂交。将Tac2-Cre等位基因系传F1代与FLPeR小鼠杂交,删除新霉素盒。
图1 Tac2-Cre小鼠构建模型
保种方式
活体保种。纯合子是可行的和可育的,但繁殖不良(可能需要四个月才能怀孕,每胎2-3只幼崽)。当维持我们的活群体时,杂合子小鼠可一起繁殖。(https://www.jax.org/strain/018938)
生殖泄露
研究应用
Tac2- cre小鼠与ROSA26-tdTomato报告小鼠杂交,我们在背根神经节、脊髓背角以及包括嗅球、大脑皮层、杏仁核、海马、缰核、下丘脑和小脑在内的许多大脑部位直接观察了Tac2谱系神经元。这个Tac2- cre等位基因本身是Tac2基因的空等位基因。行为分析表明,Tac2纯合子缺失小鼠对一系列致痛和促痒刺激反应正常。
Mar L , et al.Genetic marking and characterization of Tac2-expressing neurons in the central and peripheral nervous system.