Tagln-Cre 小鼠是一种基因工程小鼠品系,其 Cre 重组酶 表达受 Tagln 基因启动子(Transgelin, 又称 SM22α)控制,主要用于研究 平滑肌细胞 相关的基因功能。
特点与功能
1.Tagln 启动子特异性表达
•Tagln 基因是一种平滑肌特异性基因,在平滑肌细胞中高度表达,包括:
•血管平滑肌(动脉和静脉壁)。
•内脏平滑肌(胃肠道、气管和膀胱等组织)。
•这种组织特异性表达使 Tagln-Cre 小鼠适合研究平滑肌相关基因功能。
2.Cre/loxP 系统
•携带 Tagln-Cre 的小鼠与含有 loxP 位点的条件性基因敲除小鼠交配,通过 Cre 重组酶介导的基因重组,实现平滑肌细胞中特异性的基因敲除或激活。
主要研究应用
1.血管生物学和心血管疾病
•血管发育与重塑:研究基因在血管平滑肌细胞中的作用,例如动脉粥样硬化、血管再狭窄、动脉瘤形成和高血压等疾病模型。
•损伤修复机制:研究血管损伤后的平滑肌细胞迁移、增殖及修复机制。
2.内脏平滑肌功能研究
•研究消化系统、呼吸系统和泌尿系统中平滑肌的功能调控,如肠道蠕动、膀胱收缩和气管功能异常。
3.肿瘤生物学
•分析平滑肌来源的肿瘤(如平滑肌肉瘤)中关键基因的功能,或研究肿瘤微环境中的平滑肌细胞对肿瘤发展的影响。
4.基因功能研究
•特异性敲除与平滑肌发育、迁移、增殖及分化相关的基因,揭示平滑肌细胞的发育机制和疾病发生过程。
实验操作与注意事项
1.基因型验证
•使用 PCR 检测 Tagln-Cre 小鼠的基因型,确保 Cre 重组酶的表达和靶基因的条件性敲除。
2.组织特异性验证
•验证 Cre 活性是否严格限制在平滑肌细胞,以避免在非靶组织中的非特异性表达。可以结合 报告基因 (如 Rosa26-LacZ) 进行示踪实验。
3.交配策略
•与携带 loxP 位点的条件性突变小鼠交配,确保后代获得正确基因型,并在特定组织中启动基因重组。
4.背景品系
•常用背景品系为 C57BL/6,但需要注意遗传背景差异可能影响实验结果。
应用示例
1.动脉粥样硬化模型
•敲除平滑肌中的某些基因(如 TGF-β 或 Akt)以分析其对动脉粥样硬化形成的影响。
2.血管损伤修复模型
•敲除或激活与平滑肌增殖相关的基因,研究血管修复过程中的调节机制。
3.平滑肌发育和功能研究
•分析胚胎期或成年期平滑肌特异性基因敲除对器官功能的影响,例如肠道蠕动障碍或膀胱功能异常。
4.肿瘤研究
•在平滑肌相关肿瘤中特异性敲除或激活癌基因,研究肿瘤发生和发展机制。