Vasa-Cre 小鼠是一种特异性基因工程小鼠品系,广泛用于生殖生物学研究,尤其是在生殖细胞和胚胎发育方面的基因功能研究。
特点与功能
1.Cre 表达驱动基因
•Vasa 启动子:Vasa 基因(也称为 Ddx4 或 Mvh)是一种 RNA 解旋酶,在生殖细胞系中特异性表达。
•组织特异性表达:Cre 重组酶在**原始生殖细胞(PGCs)**和成熟生殖细胞(精子和卵母细胞)中特异性表达,而在体细胞中不表达。
2.时空特异性重组
•Vasa-Cre 小鼠通过Vasa 启动子驱动 Cre 重组酶表达,实现生殖细胞特异性基因敲除或激活。
•适用于胚胎期及生殖细胞发育过程的基因操作研究。
主要研究应用
1.生殖细胞基因研究
•研究基因在生殖细胞发育和功能中的作用,例如精子和卵母细胞的形成、分化和成熟机制。
2.遗传修饰和胚胎研究
•在生殖细胞中敲除或激活基因,实现后代基因修饰,从而产生条件性突变模型或基因敲入模型。
3.生殖疾病和不育研究
•分析基因突变对生殖细胞功能和生育能力的影响,用于研究不育和生殖相关疾病的机制。
4.转基因小鼠品系建立
•利用 Vasa-Cre 将遗传改变传递给后代,快速获得稳定的基因修饰小鼠模型。
基因型验证与繁育
1.基因型检测
•PCR 检测 Vasa-Cre 基因和目标基因的重组情况。
2.繁殖策略
•通常与携带 loxP 位点 的条件性敲除小鼠杂交,通过生殖细胞传递突变基因,实现子代基因修饰。
注意事项
1.特异性与泄漏表达
•在设计实验时需验证 Vasa-Cre 在体细胞中的潜在漏表达,确保实验结果的准确性。
2.基因背景选择
•常用于 C57BL/6 遗传背景,以减少品系差异对实验结果的影响。
3.基因传递模式
•通过生殖细胞传递的突变基因将对所有子代产生遗传影响,因此适合研究种系突变模型,而不适合体细胞特异性研究。
应用示例
1.生殖细胞特异性基因敲除模型
•分析某基因对生殖细胞成熟、配子形成和早期胚胎发育的作用。
2.基因编辑技术优化
•将 CRISPR/Cas9 与 Vasa-Cre 系统结合,用于胚胎期基因编辑和稳定遗传突变研究。
3.生育能力研究
•建立与不育症和生殖障碍相关的动物模型,用于筛选治疗策略和药物