免疫细胞Cre工具鼠

（1）Lyz2-Cre

表达特点

● 髓系研究中最经典、最常用的品系，重组效率高；

● 主要靶向先天免疫细胞，包括常驻肺泡巨噬细胞（100%）、肺间质巨噬细胞（100%）、中性粒细胞（100%）、单核细胞（68%-86%）、树突状细胞（DC）（50%）和嗜酸性粒细胞（20%）【1】；

● 该品系存在约20%的肺泡上皮细胞（主要为AT2细胞）泄漏【2】。

主要应用

● 研究整体髓系细胞功能

● 巨噬细胞和中性粒细胞在炎症和免疫反应中的功能探索

常用品系

● B6.129P2-Lyz2tm1(cre)Ifo/J-JAX:004781

（2）Cx3cr1-Cre

表达特点

● Cx3cr1在单核细胞、巨噬细胞、小胶质细胞、Th1细胞、CD8+ T效应细胞/记忆细胞、NK细胞、γδT细胞和DC细胞中均有表达【3】；

● 该品系对脑内小胶质细胞的重组效率极高（皮层99.2±0.3%，海马99.8±0.16%），且基本不泄漏至神经元或星形胶质细胞【4】；

● 不标记中性粒细胞，但还会靶向肥大细胞和树突状细胞；

● 腹膜巨噬细胞重组效率为70%-80%，但肺泡灌洗液（BAL）巨噬细胞、脾脏巨噬细胞及外周血单核细胞中效率相对较低（40%-60%）【5】。

主要应用

● 追踪胎儿发育期间单核细胞/巨噬细胞的命运追踪

● 巨噬细胞特异性基因敲除或巨噬细胞清除模型构建

常用品系

● B6J.B6N(Cg)-Cx3cr1tm1.1(cre)Jung/J-JAX:025524

● B6.129P2(Cg)-Cx3cr1tm2.1(cre/ERT2)Litt/WganJ-JAX:021160

（3）Csf1r-Cre

表达特点

● 在小鼠各组织的单核/巨噬细胞中广泛表达，包括肝脏、脾脏、肠道、心脏、肾脏和肌肉等；

● 特异性较差，在树突状细胞、粒细胞和T淋巴细胞中也能检测到由Cre活性【5】；

● 杂交Rosa26-YFP报告基因小鼠后，肾脏、肝脏、脾脏、肺泡巨噬细胞表达YFP中位数分别为93.25%、92.45%、91.10%、94.70%，血液单核细胞为98.20%，骨髓单核细胞为93.90%【6】。

主要应用

● 单核/巨噬细胞发育谱系示踪

● 稳态与炎症状态中巨噬细胞调控基因的功能研究

常用品系

● C57BL/6-Tg(Csf1r-cre)1Mnz/J-JAX:029206

（4）Cd68-rtTA

表达特点

● CD68-rtTA小鼠主要靶向肺间质巨噬（70%-80%），同时标记中性粒细胞（58%）、单核细胞（60%-70%）和树突状细胞（70%）；

● 几乎不标记常驻肺泡巨噬细胞，且不影响NK细胞，淋巴细胞、内皮细胞或上皮细胞【2】；

● 诱导型CD68-rtTA小鼠对巨噬细胞的特异性增强。

主要应用

● 肺部间质巨噬细胞功能研究

● 与其他巨噬细胞靶向工具鼠联用，以区分不同肺巨噬细胞群体

（5）Clec4f-cre

表达特点

● Clec4f-Cre是肝脏库普弗细胞（Kupffer cells, KCs）的高度特异性工具鼠，不影响单核细胞来源KCs（MoKCs）和肝被膜巨噬细胞（LCMs）【7】；

● 在肝脏KCs中重组效率约为90%，而在肝实质、结肠，皮肤，肾脏和脂肪等组织中均未检测到Cre活性【8】；

主要应用

● 精准区分肝脏驻留巨噬与浸润单核巨噬的独立功能

● 库普弗细胞发育与稳态的谱系示踪研究

常用品系

● C57BL/6J-Clec4fem1(cre)Glass/J-JAX:033296

（6）Cd11c-Cre (Itgax-cre)

表达特点

● 主要靶向经典树突状细胞（cDCs）和浆细胞样树突状细胞（pDCs），也在单核/巨噬细胞、部分造血干/祖细胞（HSCs）和共同淋巴样祖细胞（CLPs）中表达，导致超过50%的白细胞都出现了Cre的表达；

● 与报告小鼠杂交后，cDC重组率为96%，pDC为86%，淋巴细胞重组率较低（T细胞6%，B细胞5%）；

● 在髓系细胞中，外周血单核细胞约20%-35%，NK细胞为12%，粒细胞低于1%，肺泡巨噬细胞>90%，脾脏红髓巨噬细胞约70%【9-10】。

主要应用

● 树突状细胞基因功能研究（需接受巨噬细胞共敲）

● CD11c+抗原呈递细胞在肿瘤微环境中的功能研究

常用品系

● B6.Cg-Tg(Itgax-cre)1-1Reiz/J-JAX:008068

（7）Zbtb46-Cre (zDC-Cre)

表达特点

● 主要靶向cDC1和cDC2，不标记pDC、单核细胞和NK细胞，但在内皮细胞中有表达；

● zDC-Cre雌性cre小鼠重组效率高于雄性；

● 有研究显示，约95%的zDC-Cre雌性小鼠与floxed等位基因雄性杂交后代携带生殖系缺失，约5%的zDC-Cre雄性小鼠后代携带生殖系缺失【11】。

主要应用

● cDC特异性条件性基因敲除

常用品系

● B6.Cg-Zbtb46tm3.1(cre)Mnz/J-JAX:028538

（8）Tmem119-CreERT2

表达特点

● 特异性靶向脑实质小胶质细胞，他莫昔芬给药10天后，大脑皮层和海马体区域小胶质细胞标记特异性接近100%【12】；

● 杂合小鼠在小胶质细胞中的重组效率约50%，纯合子提升至66.1±6.47%【13】

● 在未给药时几乎未检出自发重组

主要应用

● 成年静息状态脑实质小胶质特异性基因敲除

● 小胶质细胞谱系示踪

常用品系

● C57BL/6-Tmem119em1(cre/ERT2)Gfng/J-JAX:031820

（9）S100A8-Cre（Mrp8-Cre）

● 由人源S100A8 (MRP8)启动子驱动Cre表达的随机转基因小鼠，主要在中性粒细胞和单核细胞表达。转基因序列整合至5号染色体，导致宿主基因组缺失44 kb，Serpine1基因和部分Ap1s1基因被删除，可能破坏这两个基因的表达。

表达特点

● 脾脏、外周血和骨髓粒细胞中Cre重组效率约为80%，10%-20%的粒细胞-巨噬细胞祖细胞（GMPs）存在Cre活性。【14】

● 在巨噬细胞、树突状细胞、NK细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞或嗜酸性粒细胞中几乎未发生重组【10】；

主要应用

● 中性粒细胞特异性基因功能研究

● 中性粒细胞外陷阱（NETs）相关机制研究

常用品系

● B6.Cg-Tg(S100A8-cre,-EGFP)1Ilw/J-JAX:021614

（10）Ly6G-Cre

表达特点

● Ly6G特异性表达于小鼠中性粒细胞表面。在骨髓、脾脏和外周血中，中性粒细胞Cre活性为80%-90%，其他白细胞保持阴性；

● 在造血干细胞或祖细胞群体（包括GMPs）中均未检测到Cre活性，中性粒细胞特异性优于S100A8-cre【15】；

● 重组效率高度依赖floxed等位基因，在Acod1这一特定floxed等位基因上，Mrp8-Cre实现了有效敲除，而Ly6G-Cre几乎无效。

主要应用

● 中性粒细胞特异性基因功能研究

● 体内中性粒细胞活体成像与动态追踪

常用品系

● B6.129S-Ly6atm1.1(cre)Jmol/J-JAX:032621

● 髓系细胞Cre工具鼠对比

（11）Cd19-Cre

表达特点

● 特异性靶向B细胞谱系

● 重组效率，骨髓pro-B细胞约20%—30%，pre-B细胞约40%，成熟/再循环B细胞约80%—90%，浆细胞约90%—95%；脾脏滤泡B细胞约90%—95%，边缘区B细胞约边缘区B细胞；肠系膜淋巴结－生发中心B细胞约90%—95%；腹膜腔来源B1a细胞＞95%，B1b细胞约95%【16】。

主要应用

● B细胞发育、体液免疫研究

● B细胞淋巴瘤、B细胞肿瘤免疫研究

常用品系

● B6.129P2(C)-Cd19tm1(cre)Cgn/J-JAX:006785

（12）Mb1-Cre

表达特点

● 在非常早期的B细胞谱系阶段（pre-pro-B细胞），即CD19表达之前，EYFP+细胞仅在Mb1iCre/+R26-EYFP小鼠中观察到

● Mb1-iCre在T细胞存在异常的Cre活性，但频率很低

● 靶向B细胞谱系，重组效率约90%，骨髓pre-pro-B细胞重组效率偏低【16】

主要应用

● B细胞早期发育研究

● 自身免疫病B细胞致病机制

常用品系

● B6.C(Cg)-Cd79atm1(cre)Reth/EhobJ-JAX:020505

（13）hCD2-iCre

表达特点

● 由人类CD2启动子驱动的转基因小鼠，由hCD2-iCre介导的基因缺失几乎发生在所有成熟T细胞、B细胞（>96%）和NKT细胞（>83%），在巨噬细胞和粒细胞的Cre活性极低（<5%）。

● 但也有报道在的共同淋巴祖细胞（≥27%）、NK细胞前体（≥55%）、未成熟NK细胞（≥49%）、脾脏NK细胞（约36%）、所有pDC及约20% cDC中hCD2-iCre能介导报告基因重组【17】。

主要应用

● 研究T-B协同免疫应答、体液-细胞免疫联合缺陷

● 淋巴细胞发育、淋巴细胞肿瘤及感染免疫研究

常用品系

● B6.Cg-Tg(CD2-icre)4Kio/J-JAX:008520

（14）Lck-Cre（dLck-icre）

表达特点

● 其重组特异性仅限于T细胞，非T细胞（NK细胞、B细胞和单核细胞）中未检出重组现象；

● 在外周T细胞群中，CD8+T细胞群重组效率高于CD4+T细胞群（分别为90%和75%）。3779品系能够在T细胞谱系中实现高外显率（highly penetrant）但并非100%的重组【18】。

● 少量γδT细胞（3.8±1.2%）、MAIT细胞（31.8%±6.4%）和iNKT细胞（26.5%±4.7%），同样发生重组【19】。

主要应用

● 胸腺T细胞发育、成熟T细胞功能研究

● CD4+/CD8+T、iNKT或γδT细胞体内功能

常用品系

● B6.Cg-Tg(Lck-icre)3779Nik/J-JAX:012837

（15）Cd4-Cre

表达特点

● 在αβT细胞谱系中敲除效率接近100%，包括CD4+/CD8+（DP）、CD4+或CD8+（SP）胸腺细胞，及外周αβT细胞。iNKT细胞也表现出约90%的重组率；

● 在γδT细胞中表现出嵌合重组，不同组织重组率为25%-70%，肝脏重组率最高【20】；

● Cre蛋白仅在外周CD4+T细胞中表达，而未在CD8+T细胞中表达；

● CD4-Cre小鼠在肺泡巨噬细胞（AMFs）、肺泡上皮细胞（AECs）和支气管上皮细胞（BECs）中也表现出高效的Cre介导重组【21】。

主要应用

● T细胞DP阶段基因功能研究

● T细胞相关肿瘤免疫、自身免疫疾病研究

常用品系

● B6.Cg-Tg(Cd4-cre)1Cwi/BfluJ-JAX:022071

（16）Cd8α-cre（E8I-Cre）

表达特点

● 其表达起始于CD24loCD8+SP胸腺细胞，特异性靶向CD8+T细胞；

● 与报告基因杂交后，小鼠脑中超过95%的ZsGreen+细胞为CD3+CD8+T细胞，20%的Cd8α+DCs表达ZsGreen，CD3+B220+细胞及CD4+T细胞的比例均不到1%【22】；

● 与报告小鼠Ai14杂交后，子代脾脏CD8+T细胞表现出高水平的红色荧光（95.4%±1.5%）【23】。

主要应用

● 成熟CD8+T细胞基因功能

● 肿瘤免疫、感染免疫、自身免疫等淋巴细胞免疫研究

常用品系

● C57BL/6-Tg(Cd8a-cre)1Itan/J-JAX:008766

（17）Foxp3-Cre

表达特点

● 雄性Foxp3Cre/Y存在生殖系泄露，子代出现全身性敲除，并非Treg特异性cKO，繁育尽量避免用雄性Cre阳性鼠作为父本【24】；

● 在多种免疫细胞类型中表现出不同程度（2%–10%）的异位重组，包括B细胞、T细胞、髓系细胞和骨髓前体细胞；

● 文献报道，雌性Foxp3-YFP-Cre小鼠需要达到Cre纯合表达，才能有约100%的Treg细胞发生重组。尽管有证据表明，Cre等位基因的母系遗传可能会增加异位重组的频率【25】

主要应用

● Treg特异性基因敲除

● Treg谱系示踪

常用品系

● B6.129(Cg)-Foxp3tm4(YFP/icre)Ayr/J-JAX:016959

● 淋巴细胞Cre工具鼠对比