三分钟了解小鼠体外受精快速扩繁

鼠来宝实验动物
2023-11-17


欢迎来到鼠来宝课堂《三分钟了解小鼠体外受精》。

通常情况下,我们用健康的雄鼠与雌鼠配对合笼,自然繁殖得到后代。平均每两个月得到一窝4到8只幼崽。
然而,不出意外的话,我们会遇到各种意外。
比如,亲代感染了病原体,自然繁育的仔鼠无法达到SPF标准;

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或者,雄鼠或雌鼠过度肥胖或体质虚弱,难以交配和怀孕;

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也许,雄鼠在打斗中损伤了外生殖器;
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又或者,需要大量日龄接近的子代,亲代却不够用……
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那么,我们就可以考虑“体外受精”技术了。
体外受精 (in vitro Fertilization, IVF),简单地说,就是使精子和卵细胞在生物体外融合形成受精卵。
不过,哺乳动物的受精卵在体外很难发育为完整个体,所以还需要通过胚胎移植Embryo Transfer, ET,或称受精卵移植),将其移入代孕母体,继续发育直到出生。
所以,“体外受精”和“胚胎移植”通常并称为IVF-ET技术。
小鼠体外受精和胚胎移植的大致流程是:

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  1. 给3至4周龄雌鼠腹腔注射PMSG(Pregnant Mare Serum Gonadotropin, 孕马血清促性腺激素),促进卵细胞成熟(卵巢中卵泡发育为成熟卵细胞)。
  2. 48小时后再注射hCG(human Chorionic Gonadotropin, 人绒毛膜促性腺激素),使雌鼠超数排卵(从卵巢排出远超常规数量的卵细胞到输卵管,简称“超排”)。
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  3. 12小时后先取雄鼠的附睾尾,将精子收集至获能皿培养1小时,激活精子。
  4. 然后摘取雌鼠的输卵管、收集卵细胞,移入受精滴。
  5. 接着将完成获能的活跃精子加入受精滴,进行体外受精。
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  6. 4至6小时后,将胚胎从受精滴中挑出,清洗干净,放入胚胎培养滴中培养。
  7. 第2天挑选状态良好的2细胞期胚胎,植入假孕雌鼠的输卵管中。
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  8. 等待19天,就会有乳鼠出生。
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  9. 哺乳21天,小鼠就能离乳分笼了。
由于体外受精主要依赖于合格的精子与卵细胞,可以很大程度消除亲代状态和数量的限制,所以能实现自然繁育难以达到的多种目的:

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病原净化:去除亲代携带的病原体,净化得到SPF级子代;

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品系急救:使肥胖、衰老、体弱或生殖器损伤的小鼠获得子代,挽救珍贵品系;
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快速扩群:增加供卵和代孕雌鼠用量,仅用一只雄鼠,一代就能获得数百只出生日期一致的子代,显著缩短繁育周期,提高实验稳定性;
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冻存保种:液氮冷冻精子或胚胎,低成本保存品系资源。不仅减少笼位、节约管理投入,还能减少传代、防止遗传漂变,多地备份、预防天灾人祸,便于运输、促进学术交流;

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品系复苏:复苏冷冻的精子或胚胎并获得活体动物,快速重启项目。
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此外,对于活力弱和不成熟的精子,也分别有“卵胞浆内单精子注射”( IntraCytoplasmic Sperm Injection, ICSI)及“圆形精子注射”(ROund Spermatid Injection, ROSI)技术来解决。
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总的来说,体外受精作为自然繁育的补充方案,越来越受到科研人员的欢迎。

鼠来宝IVF项目团队掌握娴熟的手术能力、采用严格的管理规程,近两年已为客户完成上千个品系的净化扩繁、冻存保种服务,欢迎咨询!


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鼠来宝生物以“打造专业的实验动物一站式服务平台”为使命,在湖北鄂州和广东佛山建有4000平米代养净化和动物实验基地,拥有500个隔离包和30000个小鼠笼位。公司于2022年开始大力发展动物实验业务,热门项目为肿瘤及其它疾病小鼠模型构建、病理检测和行为学分析。目前公司已为全国各地客户完成千余个小鼠品系的代养净化及数百个动物实验项目。
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